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產(chǎn)品展示
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細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒
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產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:78-5000 pg/mL 人富半血管生成誘導(dǎo)因子61(CYR61)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Protein SAAL1 0.156-10 U/mL ELISA Kit for Human Beta-glucuronidase 0.312-20 ng/mL 人葡糖神經(jīng)酰胺(Glu
  細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

中文名稱(chēng):細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng):Cell Apotosis DNA Ladder Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T

產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01X6379

本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(不推薦用于檢測(cè)組織樣本)。細(xì)胞核染色質(zhì)DNA 斷裂是細(xì)胞凋亡的標(biāo)志特征。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),核酸內(nèi)切酶被激活,選擇性降解染色質(zhì)DNA,形成50-300 kb 的大片段,并進(jìn)而在核小體連接處斷裂,形成180-200 bp 或其整倍數(shù)的DNA片段,這些DNA 片段可從細(xì)胞中提取出來(lái),通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳,溴化乙啶染色呈現(xiàn)為梯狀條帶(DNALadder),并據(jù)此判斷細(xì)胞凋亡產(chǎn)生。我司細(xì)胞凋亡DNA Ladder 檢測(cè)試劑盒提供了一種簡(jiǎn)便、快速地提取染色質(zhì)DNA 的方法,并增加對(duì)小片段DNA 的回收,從而增強(qiáng)了檢測(cè)的敏感性。

注意事項(xiàng)

1. DNA Ladder 出現(xiàn)在細(xì)胞凋亡晚期,觀察細(xì)胞形態(tài)已發(fā)生皺縮出芽,染色質(zhì)*凝聚,細(xì)胞核已固縮斷裂的凋亡晚期形態(tài),建議該種形態(tài)的凋亡細(xì)胞比例在30%以上時(shí)進(jìn)行DNA Ladder 檢測(cè)或先進(jìn)行Tunel檢測(cè).

2. DNA Ladder 出現(xiàn)在一個(gè)較短的時(shí)間段,在凋亡早期取樣,則無(wú)DNA 降解的條帶,而在凋亡末期取樣則產(chǎn)生與細(xì)胞壞死相似的DNA 彌散條芾。因此取樣時(shí)間需根椐不同種類(lèi)的細(xì)胞和誘導(dǎo)劑而摸索確定。

3. 貼壁細(xì)胞好不用消化而用細(xì)胞刮收集。

4. 某些細(xì)胞不產(chǎn)生這種核小體間的DNA 斷裂,而是產(chǎn)生50-300kb 的大片段斷裂。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


QQ截圖20220509112004.png

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

駱駝源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 種源性檢測(cè)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

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Fructus jujubae大棗染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Avian Herpesvirus 2(Gallid Herpesvirus-2、GaHV-2)禽皰疹病毒2型LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒通用RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白(MMP)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒  20次

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M肉湯 英文名稱(chēng):M Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10ml*20支/包

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TTC乳糖瓊脂 英文名稱(chēng):Lactose TTC agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 細(xì)胞凋亡 DNA Ladder 檢測(cè)試劑盒
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