參數(shù)規(guī)格: 產品名稱:(RT-2)牛皰疹病毒2型LAMP試劑盒說明書 英文名稱:(rt-2) lamp kit for bovine herpesvirus type 2 貨號:BJ-P987595 產品規(guī)格:50T 分類:熒光定量PCR試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產品特點: 本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。? 產品特點: ◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增; ◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝; ◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測; ◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。 樣品要求及注意事項: 1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。 2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。 3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。 4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。 儲存條件: 14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 使用方法: 一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。 1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。 3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。 4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。 5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。 6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。 二、樣品 DNA 的制備 7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產品兼容。 8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。 三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行) 9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。 特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! PCR反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。 設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據庫的其它序列無明顯同源性。 1g大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○154Human GFRA1(GDNF family receptor alpha-1) ELISA Kit 5g馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Human GLIPR1(Glioma pathogenesis-related protein 1) ELISA Kit 1g冷海水黃桿菌Human HSD3B1(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta 5–>4-isomerase type 1) ELISA Kit 5g暗產色鏈霉菌*Human ATG12(Ubiquitin-like protein ATG12) ELISA Kit 1g亮白曲霉Human FOLR2(Folate receptor beta) ELISA Kit 10g枇杷葉點霉Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) ELISA Kit 50g膠柱頭孢霉屬Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) ELISA Kit 1gPaenibacillus taichungensisHuman CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) ELISA Kit 250mg植物乳桿菌Human NOTCH2(Neurogenic locus notch homolog protein 2) ELISA Kit 25ml大腸埃希氏菌Human NOTCH4(Neurogenic locus notch homolog protein 4) ELISA Kit 25g深藍紫色桿菌Human AMOTL1(Angiomotin-like protein 1) ELISA Kit 5g大腸埃希菌Human PMEL(Melanocyte protein PMEL) ELISA Kit 1g玉米黑粉菌Human AKR1C4(Aldo-keto reductase family 1 member C4) ELISA Kit 250mg香菇Cr04Human KRT16(KeRatin, type I cytoskeletal 16) ELISA Kit 5g大腸埃希氏桿菌Human CD68(Macrosialin) ELISA Kit 1g尖孢鐮孢Human ITGB2(Integrin beta-2) ELISA Kit 25g彩色豆馬勃Human S100A11(Protein S100-A11) ELISA Kit (RT-2)牛皰疹病毒2型LAMP試劑盒說明書Phospho-Btk(Tyr223) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體沙丁胺Fmoc-3-(4-吡啶基)-L-氨酸Human MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit C5a 過敏毒素C5a(補體C5a)抗體雙胺Fmoc-3-(4-吡啶基)-L-氨酸Human MIP4α (Macrophage Inflammatory Protein 4 Alpha) ELISA Kit human C3 補體C3抗體水楊酸鎂草莓酸Human CTACK (Cutaneous T-cell Attracting Chemokine) ELISA Kit C5b-9 末端補體復合物抗體司坦唑草莓酸Human sCD14 (Soluble Cluster of Differentiation14) ELISA Kit CA125 卵巢癌抗原抗體苯妥英鈉4-乙酰嗎啉Human FcεRII/CD23 (Receptor II for the Fc Region of Immunoglobulin E) ELISA Kit CA15-3/MUC1 癌相關抗原抗體辛可尼丁4-乙酰嗎啉Human CD40L/TNFSF5 (Cluster of Differentiation 40 Ligand) ELISA Kit CACH2/CaV1.2 L型鈣通道蛋白抗體溴甲貝那替4-乙酰嗎啉Human CD163 (Cluster of Differentiation 163) ELISA Kit CACNA1G/Cav3.1 電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體鹽酸安他唑啉(S,S)-DACH-苯基特羅斯特配體Human GP39 (Glycoprotein 39, Cartilage) ELISA Kit 注意事項: 1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響PCR效率。 2. 試劑Buffer AL若低溫保存,易產生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。 3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶,影響實驗結果。 4. 建議擴增片段長度1 kb以內,以便擴增效率佳。 5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。 |