中文名稱(chēng):bromodomain抑制劑(MS436) 英文名稱(chēng):MS436 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01X7997 MS436是一種bromodomain抑制劑,有效作用于BRD4BrD1,Ki為30-50nM,比作用于BrD2選擇性高10倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! :1395084-25-9 純度:98.02% 分子量:383.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。 二. 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法: 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細(xì)胞復(fù)蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。 人 TUBB2B 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子甘油醛-3-脫氫(GAPDH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝 人 ANKMY1 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝 人 CD177 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子二胺氧化(DAO)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 人 MAEL 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子端粒(TE)免疫試劑盒*直銷(xiāo) 人 PSMC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子低密度脂蛋白(LDL-C)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝 人 TRIP13 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝 人 ECSIT 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子蛋白聚糖(ACAN)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 人 PFN2 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)免疫試劑盒*直銷(xiāo) 人 TPD52L3 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝 人 HIST1H2AG 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子催乳素(PRL/LTH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝 人 H2AFJ 基因全長(zhǎng)ORF克隆兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) bromodomain抑制劑(MS436)IGF-IR/InsR和ALK抑制劑(GSK1838705A) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg GSK1838705A1瓶 HKC細(xì)胞株 HKC 低溫運(yùn)輸和保存 CK1δ抑制劑(LH846) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg LH846沙門(mén)氏志賀氏增菌液管 9ml*20支/包 PLK1抑制劑(MLN0905) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg MLN09051000U Thrombin -70℃保存 雙重泛PI3K/mTOR抑制劑(GNE-493) 1mL(10mM)|5mg|10mg GNE-493500mL Separating or Resolving Buffer(分離膠緩沖液) Separating or Resolving Buffer 常溫保存 Bcl-2抑制劑(Gossypol acetic acid) 1mL(10mM)|200mg|500mg Gossypol acetic acid1 管 Rosettalblue(DE3)大腸桿菌 RosettalBlue(DE3) E.coli Strain -80℃保存 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)抑制劑(DC_517) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg DC_5172 ug pRS426 pRS426 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 KSP抑制劑(SB-743921) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg SB-74392150次 柱式軟骨RNAout Colume Cartilage RNAOUT 4℃保存 5α還原酶同工酶抑制劑(Dutasteride) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg Dutasteride2 ug pcDNA6 pcDNA6 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 I型PI3K抑制劑(CH5132799) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg CH5132799HBI沙門(mén)氏菌生化鑒定條(GB) 5條/盒 mTOR抑制劑(WYE-125132) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg WYE-1251325g 乙酸- 2 -萘脂 2-Naphthyl Acetate 室溫保存 二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)抑制劑(Gimeracil) 1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|500mg Gimeracil50T 普氏立克次體PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 操作規(guī)程 1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí). 2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。 3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。 4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。 7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。 8、結(jié)果分析 a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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