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SVEC4-10(小鼠淋巴結內皮細胞)
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產品特點:
SVEC4-10(小鼠淋巴結內皮細胞)在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。
  SVEC4-10(小鼠淋巴結內皮細胞)的詳細資料:

本公司代理ATCC細胞,提供售前售后一條龍服務,若要獲取詳細的說明書或價格信息,請咨詢在線客服。

產品名稱

英文名稱

規(guī)格

SVEC4-10(小鼠淋巴結內皮細胞)

SVEC4-10 (mouse lymphatic endothelial cells)

5×106cells

產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
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細胞培養(yǎng)技巧:
一、凍存時的注意事項:
1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %
2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。
3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽
滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。
4. 冷凍保存的細胞濃度:
4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。
4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。 
凍存的步驟:
1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基,觀察細胞生長情形。
2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻,置于室溫下待用。
3. 依細胞傳代培養(yǎng)的操作,收集培養(yǎng)好的細胞,取少量細胞懸浮液(約0.1 ml) 計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
4. 離心,去除上清液,加入適量冷凍保存溶液,使細胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml,混合均勻,
分裝于已標示*之冷凍保存管中,1 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。
5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長期儲存。
6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設定程序之等速降溫機中,再放入液氮槽中。程序為: program 7: HB CELL 。
培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
特比芬-d7鹽鹽 質量規(guī)格:美國進口 Terbinafine-d7 Hydrochloride 大腸菌群顯色培養(yǎng)基/Coliform Chromogenic Medium快速準確檢測大腸菌群,大腸菌群培養(yǎng)24小時,顯蘭色1升國產/進口

 ;Borneol 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 胰島素抗體 RCOR2 ELISA Kit REST輔抑制因子2(RCOR2)ELISA試劑盒

β-細辛腦;β-Asarone 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢 RK1(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2

偽堿 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg 化KB抑制蛋白激酶α抗體 IL1α ELISA Kit 白介素1α(IL1α)ELISA試劑盒

N,N-二去基鹽曲美布汀 質量規(guī)格:美國進口 N,N-Didesmethyl Trimebutine Hydrochloride Lncap clone FGC(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2

紫蘇 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 絲氨抑制蛋白激酶C底物抗體 SDPR ELISA Kit 血清剝奪反應相關蛋白(SDPR)ELISA試劑盒

玉米素核苷同分異構體混合物 質量規(guī)格:美國進口 Zeatin riboside mixed Isomers Ca Ski(人宮頸上細胞)5×106cells/瓶×2

羊藿素 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 結合珠蛋白/觸珠蛋白抗體 DEFβ131 ELISA Kit 防御素β131(DEFβ131)ELISA試劑盒

靛藍;Indigo 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg CD2抗體 IL-1RA ELISA Kit 白介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒

血根堿;Sanguinarine 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 BMP4 ELISA Kit 骨成型蛋白4(BMP4)ELISA試劑盒

芝素 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 丙胺單克隆抗體 SDH ELISA Kit 山梨脫酶(SDH)ELISA試劑盒

百秋李 訂購|咨詢 規(guī)格: 30mg 溶酶體累積病相關蛋白/口吃相關蛋白抗體 MYH10 ELISA Kit 肌球蛋白重鏈10(MYH10)ELISA試劑盒

倍他米松 21-醋鹽 質量規(guī)格:美國進口 Betamethasone 21-acetate 改良淋病奈瑟菌選擇性瓊脂平板10塊國產/進口

SVEC4-10(小鼠淋巴結內皮細胞)CD45/B220  白細胞共同抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml

Ribonuclease Inhibitor  核糖核酸酶抑制因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-rabbit IgG/FITC  FITC標記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.3ml

BMP3  骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

POMC  阿黑皮素原抗體 規(guī)格: 0.1ml

HRG-alpha/Neuregulin 1  Heregulin α蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

DAT/Dopamine transporter  多巴胺轉運蛋白DAT抗體 規(guī)格: 0.1ml

HDL/high density lipoprotein  高密度脂蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

gamma Synuclein  核突觸蛋白-γ抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAVS  線粒體抗病毒信號MAVS蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Borealin/CDCA8  細胞分裂周期蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-ER-beta(ser105)  磷酸化雌激素受體β抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAGEB1  黑色素瘤相關抗原B1抗體 規(guī)格: 0.2ml

GYPB/CD235b  型糖蛋白δ抗體 規(guī)格: 0.2ml

產品相關關鍵字: SVEC4-10 小鼠淋巴結內皮細胞 5×106cells
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