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產(chǎn)品展示
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磷酸丙糖異構(gòu)酶測(cè)試盒50管/48樣
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產(chǎn)品型號(hào):
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產(chǎn)品特點(diǎn):
磷酸丙糖異構(gòu)酶測(cè)試盒50管/48樣公司正在出售的產(chǎn)品:4.69-300 ng/mL ELISA Kit for Heparan sulfate 0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Arachidonate 15-lipoxygenase B 0.312-20 ng/mL 人磷脂酰肌醇聚糖合成類蛋白F(PIG-F)ELISA試劑盒 78-5000 pg/mL 人70k
  磷酸丙糖異構(gòu)酶測(cè)試盒50管/48樣的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:磷酸丙糖異構(gòu)酶測(cè)試盒50管/48樣

檢測(cè)方法:紫外分光光度法

產(chǎn)品分類:糖酵解系列

產(chǎn)品規(guī)格: 50管/48樣

檢測(cè)方法:紫外分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01S9807

商品介紹:

測(cè)定意義:

磷酸丙糖異構(gòu)酶是重要的糖酵解酶,廣泛存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi),在機(jī)體內(nèi)參與葡萄糖代謝,在糖酵解,糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發(fā)揮著重要作用。

測(cè)定原理

磷酸丙糖異構(gòu)酶將磷酸二羥丙酮轉(zhuǎn)化為3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛與NAD在3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH,340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構(gòu)酶的活性的高低。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。

圖片1.png 

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
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注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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