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產(chǎn)品展示
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PI3K抑制劑(SF2523)
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產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點:
PI3K抑制劑(SF2523)公司正在出售的產(chǎn)品:Transglutaminase 2/TGase2 轉(zhuǎn)谷2抗體 規(guī)格: 0.2mlCYP3A1 細胞色素P450 3A1抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/PE PE標記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1mlGALT 磷酸半糖尿苷酸轉(zhuǎn)移1抗體 規(guī)格: 0.2mlC5b-9 末端補體復合物抗體 規(guī)格: 0.2
  PI3K抑制劑(SF2523)的詳細資料:

培養(yǎng)操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 

產(chǎn)品參數(shù):

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

PI3K抑制劑(SF2523)

SF2523

1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

BJ-01X8194

商品詳細介紹:

SF2523是一種有效的選擇性PI3K抑制劑,抑制PI3Kα,PI3Kγ,DNA-PK,BRD4和mTOR,IC50分別為34nM,158nM,9nM,241nM和280nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

:1174428-47-7

純度:99.37%

分子量:371.41

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

2.png 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

GFPT1 基因全長ORF克隆人膽囊收縮素/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒進口、分裝

MAP3K11 / MLK3 基因全長ORF克隆人轉(zhuǎn)運體樣蛋白4(SLC44A4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

HIST1H3A 基因全長ORF克隆人乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)免疫試劑盒*直銷

MDM2 基因全長ORF克隆人氧化代謝物 免疫試劑盒進口、組裝

HPGD 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆人酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)免疫試劑盒進口、分裝

CRABP2 基因全長ORF克隆人7α-羥化(CYP7A)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

CD96 基因全長ORF克隆人(CH)免疫試劑盒*直銷

CSRP1 基因全長ORF克隆人單絲蛋白激1(LIMK1)免疫試劑盒進口、組裝

FGL2 基因全長ORF克隆人單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒進口、分裝

ABL1 基因全長ORF克隆人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

JAK2 基因全長ORF克隆人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒*直銷

PI3K抑制劑(SF2523)Western Blot增強劑  100ml  Western Blot Signal Enhancer500mL Carbonate Buffered Saline(鹽緩沖鹽水),5X,pH9.0   Carbonate Buffered Saline,5X,pH9.0   常溫保存

Western blot預染蛋白Marker(19~110kDa)  100μl(20~50T)  Prestained Protein Marker(20~110kDa) For Western Blot10mL 電泳級二甲苯藍FF溶液 Xylene Cyanol Solution,EG 常溫密封干燥避光保存

RIPA裂解緩沖液(Western Blot)  100ml  RIPA Lysis Buffer For Western Blot2 ug pHag cmv2 pHag cmv2 低溫運輸,-20℃保存

RIPA裂解緩沖液(Co-IP/IP)  100ml  RIPA Lysis Buffer For Co-IP/IP瓊脂培養(yǎng)基N(溴化十六烷基胺瓊脂) Agar Medium N(Cetrimide Agar) 250g

一管式TMB顯色液(沉淀型)  100mL  One-Tube TMB Solution1瓶 Hs 578T細胞株 Hs 578T 低溫運輸和保存

一管式TMB顯色液(可溶型)  100mL  One-Tube TMB SolutionAmies運送培養(yǎng)基管 Amies Transport Medium 20支/包

Protein A免疫沉淀磁珠試劑盒  20次/100次  Protein A Immunoprecipitation Kit2 ug pET-31b(+) pET-31b(+) 低溫運輸,-20℃保存

Protein A/G免疫沉淀磁珠試劑盒  20次/100次  Protein A/G Immunoprecipitation Kit250mL Sodium Borate Buffer(硼酸鈉緩沖液),0.5M,pH8.5   Sodium Borate Buffer,0.5M,pH8.5   常溫保存

超靈敏ECL免疫印跡化學發(fā)光檢測試劑盒  50ml/100ml/200ml  50次 植物葉綠體蛋白提取試劑盒  

高靈敏ECL免疫印跡化學發(fā)光檢測試劑盒  50ml/100ml/200ml/250ml  2 ug pSC194 pSC194 低溫運輸,-20℃保存

雙顯色抗大鼠IgG免疫組化試劑盒(POD和FITC)  1ml|2ml|5ml  Double chromogenic Immunofluorescence kit for human IgG(FITC&POD)50次 柱式植物RNAout Column Plant RNAOUT 4℃保存

 


產(chǎn)品相關關鍵字: PI3K 抑制劑
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