實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟
典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合，兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品特點：
1. 停乳鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒使用化學修飾的熱啟動聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強，反應(yīng)重復性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
 特異性熒光標記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標記有報告基團（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標記有熒光淬滅基團 （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標定量：
內(nèi)標（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細胞中的表達量或在基因組中定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

1,2-二分子式：128.13英文名稱：1,2- two cyanobenzene：91-15-6分子量： C8H4N2

錳粉/錳片分子式：54.94英文名稱：Manganese powder / manganese tablet：7439-96-5分子量： Mn

硬脂酸鋁分子式：877.4英文名稱：Aluminium stearate：637-12-7分子量： C54H105AlO6

2-氯-6-甲吡分子式：127.57英文名稱：2- -6- methyl pyridine：18368-63-3分子量： C6H6ClN

2-溴-5-甲噻唑分子式：178.05英文名稱：2- bromo -5- methylthiazole：41731-23-1分子量： C4H4BrNS

2-氯-6-乙氧吡分子式：157.6英文名稱：2- -6-, ethyl：42144-78-5分子量： C7H8ClNO

6-硝喹啉分子式：174.16英文名稱：6- nitro group：613-50-3分子量： C9H6N2O2

四硼(2-乙-4-甲)咪唑分子式：430.39英文名稱：Four benzene -4- (2- ethyl methyl)：53831-70-2分子量： C30H31BN2

2',3'-二-O-乙酰-5'-脫氧-5-氟-D-胞分子式：329.28英文名稱：2', 3'- two, -O-, -5'-,, -D-, -5-：161599-46-8分子量： C13H18FN3O6

4-溴吡唑分子式：146.97英文名稱：4- bromide：2075-45-8分子量： C3H3BrN2

2,4,5-三氯聯(lián)英文名稱：2,4,5- three - - - - - - - - - -分子式：257.54分子量： C12H7Cl3：16606-02-3

停乳鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒酪蛋白胨/酪胨/胰酪胨/胰酪蛋白胨/CasitoneBR250克國產(chǎn)/進口

人前列腺細胞Hacat(人永生化角質(zhì)形成細胞)

解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

MR-VP培養(yǎng)基/MR-VP試驗用培養(yǎng)基/緩沖葡萄糖肉湯/葡萄糖肉湯/MR VP Broth腸桿菌科細菌的甲基紅和VP試驗250克國產(chǎn)/進口

整合素α5(ITGα5)重組蛋白英文名稱：Recombinant Integrin Alpha 5 (ITGa5)

CCL-149(大鼠肺泡上細胞)5×106cells/瓶×2

菌種培養(yǎng)基/Strain Medium（For B.Cerus）四環(huán)素檢測中蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

BL瓊脂培養(yǎng)基/BL Medium雙岐桿菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus人羊膜上皮細胞

胰蛋白胨/胰蛋白胨/TryptoneBR250/500克國產(chǎn)/進口

泡盛曲霉 Aspergillus awamori費氏中華瘤菌 Sinorhizobium fredii