凍存的步驟：
1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基，觀察細(xì)胞生長情形。
2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻，置于室溫下待用。
3. 依細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作，收集培養(yǎng)好的細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1 ml) 計數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4. 離心，去除上清液，加入適量冷凍保存溶液，使細(xì)胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml，混合均勻，
分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中，1 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。
5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16～18 小時(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長期儲存。
6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設(shè)定程序之等速降溫機(jī)中，再放入液氮槽中。程序?yàn)? program 7: HB CELL 。

本公司代理ATCC細(xì)胞，提供售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說明書或價格信息，請咨詢在線客服。

產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
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細(xì)胞培養(yǎng)技巧：
一、凍存時的注意事項(xiàng)：
1. 在冷凍保存之前，應(yīng)觀察細(xì)胞生長是否良好(log phase) 且存活率高，凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 ％
2. 冷凍前檢測細(xì)胞是否保有其*性質(zhì)，例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。
3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級等級，以5~10 ml 小體積分裝，4 度避光保存，勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽
滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。
4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度：
4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml，細(xì)胞濃度不要太高，某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。
4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6，依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度，而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %或10 ％ DMSO，若是不確定細(xì)胞之冷凍條件，在做冷凍保存之同時，亦應(yīng)作一個backup culture，以防止冷凍失敗。 
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human C/EBPε (CCAAT/Enhancer Binding Protein, Epsilon) ELISA Kit

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白γ(C/EBPγ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human CEBPγ (CCAAT/Enhancer Binding Protein Gamma) ELISA Kit

人CC趨化因子受體1(CCR1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human CCR1 (CC-Chemokine Receptor 1) ELISA Kit

人保護(hù)素(CD59)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CD59 (Protectin) ELISA Kit

人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CCP (Complement Control Protein) ELISA Kit

人細(xì)胞分裂周期蛋白23(CDC23)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CDC23 (Cell Division Cycle Protein 23) ELISA Kit

人著絲粒蛋白A(CENPA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human CENPA (Centromere Protein A) ELISA Kit

人著絲粒蛋白E(CENPE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human CENPE (Centromere Protein E) ELISA Kit

人著絲粒蛋白H(CENPH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human CENPH (Centromere Protein H) ELISA Kit

人著絲粒蛋白I(CENPI)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human CENPI (Centromere Protein I) ELISA Kit

人著絲粒蛋白B(CENPB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Human CENPB (Centromere Protein B) ELISA Kit

人中心體蛋白110(CEP110)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CEP110 (Centrosomal Protein 110kDa) ELISA Kit

人碳酸酐酶VB(CA5B)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit

人絲切蛋白1(CFL1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit

膽道癌組織源細(xì)胞規(guī)格STARD5  促黃體激素誘導(dǎo)蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

IFI44  干擾素誘導(dǎo)蛋白44抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-MYL9(Thr19)  磷酸化肌球蛋白輕鏈9抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Thr239)  磷酸化原基因c-Jun抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAP1B  微管相關(guān)蛋白1B抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-LATS1 (Thr1079)  磷酸化瘤抑制基因LATS1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Calcitonin  降鈣素抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

ADO  2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Biotin/PE  PE標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml

alpha 1 Spectrin/Spectrin α  影蛋白/收蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/APC  APC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

OAT-1/SLC22A6  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.1ml